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蛋白酶K的應用

近年來，隨著對蛋白酶K研究的深入，該酶的應用范圍不僅在醫療診斷及科研領域得到了十分廣泛的應用，該酶還作為替代其它作用范圍較窄的蛋白酶，主要應用于造紙、工業制革、飼料生產、食品加工等行業中。此外，該酶還可以替代傳統的通過化學方法處理原材料的方法，減少污染。在各行各業中，蛋白酶K的主要用途有：①在分離DNA和RNA的過程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。蛋白酶K能降解與核酸結合的蛋白質，促進蛋白與核酸的分離，因此該酶在提取高分子量的核酸時具有很大的優勢。蛋白酶K還常被用于RNA提取過...

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什么是蛋白酶K，蛋白酶K的生產有哪些挑戰？

蛋白酶K(ProteinaseK)是一種廣譜絲氨酸蛋白酶,蛋白酶K于1974年在fungusEngyodontiumalbum的提取物中發現。能合成該種蛋白酶的微生物能在以角蛋白(Keratin)作為碳源和氮源的環境中生長，說明該酶可以消化角蛋白，因此被稱為“蛋白酶K”。蛋白酶K由一條肽鏈組成，含有277個氨基酸，該蛋白的相對分子量~28.9kDa，蛋白酶K是一種穩定且具有高活性的絲氨酸蛋白酶。晶體和分子結構研究證據表明該酶屬于枯草素家族，具有活性位點催化三聯體(Asp39-...

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熒光蛋白Marker優化方案

熒光蛋白Marker優化方案有報道稱一種自預染熒光蛋白Marker，能夠實現蛋白Marker即是預染蛋白又是曝光蛋白。具體原理是：將天然提取的熒光蛋白（包括藻紅蛋白、藻藍蛋白、別藻藍蛋白、綠色熒光蛋白、黃色熒光蛋白和紅色熒光蛋白等，其分子量為20-300kDa），與能夠結合抗體IgG的proteinA、proteinG和能被二抗結合的抗體Fc區蛋白或肽共價偶聯，由于熒光蛋白自帶顏色，從而實現蛋白即是預染蛋白，又是熒光蛋白的目的，無需轉膜染色或X光片成像，此外，熒光蛋白Mark...

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mRNA疫苗生產流程及具體步驟

mRNA疫苗生產流程及具體步驟Step1：將含病毒的核酸序列的質粒，注入到大腸桿菌中，這里的質粒可以是從病毒中提取，但更安全有效的方法是根據發表的核酸序列優化設計直接連接到質粒上，避免跟病毒直接接觸；Step2：在溫暖適宜的條件下，大量繁殖生長攜帶了質粒的大腸桿菌；Step3：將上述生長繁殖的大腸桿菌轉移至體積更大的營養液里，適宜條件下存放發酵，使其復制億萬級別的質粒；Step4：發酵結束后，加入酶或者其他化學物質分解大腸桿菌細胞壁，收集并純化質粒；Step5：檢測上述的質粒...

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初代測序技術分類及原理

1977年Sanger和Gilbert分別提出雙脫氧鏈終止法和化學降解法測序法，標志著初代測序技術的誕生。初代測序技術分類Maxam-Gilbert化學降解法測序1.測序原理：先對DNA片段的5'或3'端進行放射性標記，再采用特異性化學試劑修飾和裂解特定的堿基位點，從而得到一系列有共同放射起點但長度不一的DNA片段混合物，通過對此混合物進行聚丙烯酰胺凝膠電泳即可從放射自顯影片直接讀出DNA堿基序列。2.堿基序列的識讀：聚丙烯酰胺凝膠電泳可以將DNA片段混合物按片段大小分開，片...

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